Uma boa forma de cultivar bactérias em placas de Petri

Escrito por john brennan | Traduzido por daniel tamayo
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Uma boa forma de cultivar bactérias em placas de Petri
É importante praticar uma série de técnicas de esterilização ao cultivar bactérias (Jupiterimages/Photos.com/Getty Images)

Cultivar culturas puras de bactérias é uma técnica importante para biólogos moleculares e microbiólogos dominarem. Os microbiólogos precisam isolar linhagens específicas de bactérias para caracterizá-las e estudá-las, enquanto o biólogo molecular muitas vezes usa a E. coli em cultura para produzir as proteínas desejadas ou copiar um gene. Quando está trabalhando com culturas de bactérias em um laboratório ou outra instalação, é importante perceber que você e tudo que você toca podem contaminar sua cultura com bactérias de outras espécies. Para evitar introduzir essas espécies em sua cultura, você deve praticar técnicas de esterilização a todo momento.

Nível de dificuldade:
Moderadamente desafiante

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O que você precisa?

  • Luvas e proteção para os olhos
  • Meio de cultura da bactéria desejada
  • Placa de ágar nutritivos preparada (placa de Petri)
  • Bico de Bunsen e acendedor
  • Placa de vidro contendo álcool 95%
  • Ansa de inoculação
  • Parafilm
  • Incubadora em 37°C

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Instruções

  1. 1

    Coloque suas luvas e proteção nos olhos.

  2. 2

    Leve o meio de cultura da bactérias que você deseja cultivar até a bancada, junto com uma placa de Petri preparada com ágar nutritivo. Certifique-se que o meio de cultura fique sempre coberto.

  3. 3

    Conecte o bico de Bunsen à saída de gás da bancada. Ligue o gás e com cuidado acenda o fogo. Certifique-se de que não há materiais inflamáveis próximos, especialmente a placa de vidro com o álcool. Mantenha a placa de vidro coberta para garantir que o vapor inflamável não se acumule.

  4. 4

    Mergulhe a ponta da ansa no etanol, depois segure-a na chama do Bunsen até que o metal fique vermelho. Tome cuidado para não tocar o material e se queimar. Certifique-se de recobrir a placa com etanol imediatamente.

  5. 5

    Remova a tampa do tubo de ensaio contendo o meio de cultura da bactéria. Coloque a ponta do tubo nas chamas por um segundo, para matar qualquer bactéria na ponta. Não coloque o tubo inteiro no fogo, apenas a ponta, e não deixe que fique lá por muito tempo.

  6. 6

    Segure a ansa de inoculação próximo ao tubo contendo o meio, depois coloque-a dentro do tubo por 15 segundos, sem tocar o meio - o metal quente irá matar as bactérias.

  7. 7

    Mergulhe a ponta da ansa no meio por um segundo.

  8. 8

    Remova a ponta da ansa e segure-a no ar. Enquanto isso, coloque a ponta do tubo de ensaio no fogo novamente e depois feche com a tampa.

  9. 9

    Segura a tampa da placa apenas um pouco longe da placa. Gentilmente passe a ansa para frente e para trás através do ágar, em um padrão de zigue-zague.

  10. 10

    Recoloque a tampa da placa e esterilize novamente a ansa, como fez anteriormente.

  11. 11

    Desligue o bico de Bunsen.

  12. 12

    Vire a placa com a tampa de cabeça para baixo, de forma que o ágar fique para cima. use o Parafilm para selar o buraco entre a placa e a tampa, indo por toda volta ao redor da peça, de forma que o buraco fique selado completamente. O Parafilm é um tipo de filme plástico usado nos laboratórios para selar tubos de ensaio e outros recipientes.

  13. 13

    Transfira a placa até a incubadora e reserve por 48 horas aproximadamente. A incubadora deve ser colocada em uma temperatura fisiológica, que é de 37°C.

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