Como calcular diluições em série na microbiologia

Escrito por julie revel | Traduzido por bruno queiroz
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Como calcular diluições em série na microbiologia
As diluições em série são usadas ​​para reduzir a concentração da amostra original (Jupiterimages/Comstock/Getty Images)

As diluições em série são utilizadas em laboratórios químicos e biológicos principalmente para realizar experimentos. Geralmente elas são apresentadas em escalas logarítmicas ou por múltiplos de 10. Na maioria das vezes, as bactérias, células e solutos são diluídos para agirem como controladores nas experiências. Diluições ainda servem para dar um alto grau de precisão em experimentos do tipo dose-resposta, onde toda as amostras são derivadas de um mesmo lote. Além disso, elas podem ser necessárias para reduzir o número de partículas em uma amostra para o uso em um equipamento automatizado. As diluições em série são concluídas ao pegar um pequeno volume da amostra original, despejá-la em um frasco novo e retorná-la ao volume original junto da solução diluída. A fórmula geral é: concentração inicial / fator de diluição = nova concentração. No exemplo dado a seguir, calcularemos uma diluição em série de 10 mL de 2,5x10^7 células/mL para 25 células/mL com um fator de diluição de 100.

Nível de dificuldade:
Moderadamente fácil

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O que você precisa?

  • Óculos de proteção
  • Luvas
  • 10 mL de 2,5x10^7 células/mL
  • Três tubos de ensaio de 100 mL
  • Lápis de cera
  • Pipeta de 1 mL
  • Pipeta de 100 mL

Lista completaMinimizar

Instruções

  1. 1

    Coloque os óculos de proteção e as luvas antes de manusear as substâncias.

  2. 2

    Coloque etiquetas nos três tubos de ensaio utilizando o lápis de cera dessa maneira: 2.5 x 10^5, 2.5 x 10^3, 25 células/mL.

  3. 3

    Utilize a fórmula (concentração original de células / fator de diluição = nova concentração) para solucionar a primeira diluição. A concentração original será de 2,5x10^7, o fator de diluição de 100 e o resultado da nova concentração dessa etapa ficará como 2,5x10^5 células/mL.

  4. 4

    Dilua a amostra original de 2,5x10^7 células/mL pelo fator de 100. Retire 1 mL da solução original com a pipeta correspondente e despeje dentro do tubo etiquetado com "2.5 x 10^5 células/mL". Com a outra pipeta, despeje 99 mL adicionais de água no tubo para completar a diluição pretendida.

  5. 5

    Dilua novamente as células por outro fator de 100. Retire da mesma maneira anterior, mas agora com 1 mL do tubo de 2,5 x 10^5 células/mL dentro do tubo etiquetado com "2,5 x 10^3 células/mL". Adicione novamente 99 mL de água nesse novo tubo para completar a diluição, que resultará em 2,5 x 10^3 células/mL.

  6. 6

    Dilua novamente as células agora pela última vez. Repita o mesmo procedimento anterior despejando agora dentro do tubo etiquetado com "25 células/mL". Adicione os 99 mL de água para completar o processo e chegar à diluição desejada de 25 células/mL.

Dicas & Advertências

  • Soluções devem ser diluídas por fatores de 10, 100, 1000 ou superior.
  • Equipamentos de proteção devem ser utilizados caso se vá trabalhar com soluções biológicas e químicas.

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