Como calcular UFC a partir de diluições

Escrito por eric moll | Traduzido por joanna riva
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Como calcular UFC a partir de diluições
Utilize uma alça de inoculação metálica estéril para espalhar a amostra sobre a superfície de ágar (Bacteria Colonies image by ggw from Fotolia.com)

UFC significa Unidades Formadoras de Colônia, um termo utilizado em microbiologia para quantificar o número de bactérias presentes em uma solução. Dependendo da concentração da amostra, será necessário realizar múltiplas diluições e colocar as amostras em placas de Petri. Se há muitas colônias de bactérias será difícil de realizar a contagem, e se há poucas, a amostra pode não ser representativa. Geralmente, é uma boa ideia colocar nas placas amostras da solução original, uma de diluição 1/10 (1 parte de solução e 9 partes de solução salina), uma de diluição 1/100 e uma de 1/1000.

Nível de dificuldade:
Moderado

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Instruções

    Calcular UFC a partir de diluições de bactérias

  1. 1

    Realize uma contagem preliminar de cada placa após o tempo de incubação das bactérias, geralmente um ou dois dias. Você deve contar apenas colônias individuais, que devem ser pontos isolados distintos, não conjuntos de colônias que cresceram juntas. Escolha a placa que tenha mais de 30 e menos de 300 colônias.

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    Conte o número de colônias individuais. Este é o número de UFC da sua diluição - você deverá realizar um cálculo simples para determinar o UFC da sua amostra original. Para esse exemplo, uma placa hipotética contendo 46 colônias será utilizada.

  3. 3

    Determine o tamanho da diluição que utilizou. Idealmente, você deve rotular as placas de Petri no início do experimento. Para esse exemplo, você pode ter misturado 1 ml da cultura de bactérias com 99 ml de solução salina. Isso forma uma diluição 1/100.

  4. 4

    Multiplique o grau da diluição pela quantidade que você pôs na placa. Se nesse exemplo você colocou 0,1 ml da sua diluição 1/100 no ágar, você deve multiplicar 0,1 x 1/100 para um resultado de 1/1000 ou 0,001.

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    Divida o número de UFC da diluição (número de colônias que você contou) pelo resultado obtido na etapa 4. Para esse exemplo, você dividiria 46 por 1/1000, que é o mesmo que multiplicar por 1000. O resultado é de 46000 UFC na amostra original.

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