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Como usar um espectrofotômetro

Atualizado em 20 julho, 2017

O espectrofotômetro é um dispositivo utilizado para medir a luz em um comprimento de onda específico. Ele consiste de duas partes: um espectrômetro e um fotômetro. O espectrômetro fornece luz em um comprimento de onda específico. O fotômetro mede a intensidade da luz. Ao calcular a quantidade de luz que a solução é capaz de absorver e aplicar a Lei de Beer, a espectrofotometria pode determinar a concentração de uma solução colorida.

Instruções

    Espectrofotômetro

  1. Ligue o espectrofotômetro e espere de 5 a 10 minutos para que ele aqueça.

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  2. Encontre o botão de comprimento de onda atrás do compartimento de amostras e escolha o comprimento.

  3. Gire a roda de filtro para selecionar o filtro correspondente. Use violeta para comprimentos de onda entre 300 e 375 nm, azul para comprimentos de onda entre 375 e 520 nm, amarelo para comprimentos de onda entre 520 e 740 nm e vermelho para comprimentos de onda de 740 e mais de 900 nm.

  4. Pressione o botão de modo, localizado na frente do espectrofotômetro, para escolher o modo em que são exibidas a porcentagem de transmitância e a simultaneidade de absorção.

  5. Abra a câmara de amostra, certifique-se de que está vazia, e feche-a. Gire o indicador da esquerda para escolher porcentagem de transmitância a 0%.

  6. Use luvas e limpe um cuvete com uma toalha de laboratório para diminuir os riscos de resultados errados. Coloque o cuvete, com três quartos de solvente, na câmara de amostra e feche a porta.

  7. Rode o indicador da direita até que se leia 100% T.

  8. Remova o cuvete com solvente e substitua-o pelo cuvete com amostra. Feche a câmara de amostra.

  9. Veja o medidor para determinar a leitura. Anote-a.

    Espectrofotômetro 20/20D

  1. Ligue o espectrofotômetro e espere 15 minutos para que aqueça. Isso é necessário para a máquina funcionar corretamente.

  2. Ajuste o botão de comprimento de onda ao lado do compartimento de amostras para o comprimento desejado.

  3. Cheque a câmara de amostra para se certificar de que ela está vazia e a feche. Ajuste o indicador da esquerda até que se leia 0.

  4. Use luvas e limpe um cuvete com uma toalha de laboratório. Coloque o cuvete na compartimento de amostra e feche a porta.

  5. Ajuste o botão de controle de luz, localizado na direita do espectrofotômetro, rodando-o até atingir 100. Remova o cuvete vazio e coloque um cuvete com amostra. Anote o valor mostrado no medido.

    Espectrofotômetro Educator

  1. Ligue o espectrofotômetro e espere por 15 minutos para que ele aqueça.

  2. Pressione o selecionador de porcentagem T/A e o modo porcentagem de transmitância ou porcentagem de absorção. Localize o indicador de onda atrás da câmara de amostra e escolha o comprimento de onda desejado.

  3. Use luvas e limpe um cuvete com uma toalha de laboratório. Remova qualquer impressão digital. Coloque o cuvete limpo com solvente na câmara de amostra e feche a porta.

  4. Ajuste o indicador direito em 100% se em porcentagem de transmitância ou 0% se em modo de absorção.

  5. Substitua o cuvete com solvente por um cuvete com amostra. Anote o valor mostrado no espectrofotômetro.

    Espectrofotômetro 401

  1. Cheque a câmara de amostra para se certificar de que está vazia e fecha a porta. Pressione o botão de ligar, localizado atrás da máquina. Espera 10 minutos para que o espectrofotômetro aqueça.

  2. Digite o comprimento de onda desejado no teclado e pressione "go to".

  3. Use luvas para limpar qualquer impressão digital do cuvete vazio. Coloque-o na câmara de amostra, alinhando o cuvete com a frente da máquina.

  4. Localize o botão "zero automático" no teclado do espectrofotômetro e aperte.

  5. Substitua o cuvete vazio por um com amostra. Anote a absorção mostrada na tela.

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Dicas

  • Filtros de luz especiais podem ser necessários em alguns espectrofotômetros quando funcionando em certos comprimentos de luz.
  • A máquina deve ser zerada após cada teste.

Aviso

  • Se o espectrofotômetro não aquecer corretamente, os resultados podem ser incorretos.
  • Certifique-se de que os cuvetes não tenham nenhuma partícula, manchas ou impressão digitais, pois esses podem atrapalhar os cálculos da máquina.
  • Espectrofotômetros são máquinas caras. Tome cuidado para não estragá-la.

O que você precisa

  • Espectrofotômetro
  • Luvas
  • Toalhas de laboratório
  • Cuvetes com solução branca (solvente)
  • Cuvetes com amostras de soluções

Referências

Recursos

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