Como preparar uma solução tampão

Escrito por carla boulianne | Traduzido por antonio silva
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Como preparar uma solução tampão
Materiais laboratoriais para fazer uma solução tampão de Tris (Photo courtesy of Emmi P. @morgueFile.com)

Solução tampão é uma solução que resiste a variações de pH, porque contém ácidos e bases fracas conjugados que neutralizam tanto os íons H + quanto OH-. Ela é constituída por ácidos ou bases fracas e o sal que deu origem ao ácido ou base. A seleção de um sistema tampão apropriado depende do intervalo de pH para tamponamento. A maioria das reações biológicas ocorre em um intervalo de pH de 6 a 8. Os tampões de fosfato atuam em um intervalo de pH de 6,5 a 7,5. Tampões de ácido carboxílico são úteis a partir de um pH de 3 a 6. Os de borato funcionam em pH de 8,5 a 10. Tampões de aminoácidos, tais como glicina e histidina, atuam em uma diversidade de valores de pH. O tampão Tris é um dos sistemas mais utilizados em laboratórios de biologia. Cálculos para uma solução tampão de Tris serão utilizados no exemplo a seguir, mas a metodologia aplica-se a qualquer solução tampão.

Nível de dificuldade:
Moderado

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O que você precisa?

  • Água destilada
  • Base em pó ou cristal
  • Ácido clorídrico (HCl)
  • Cilindro graduado
  • Balão volumétrico
  • Barra de agitação magnética
  • Agitador de placa quente
  • Medidor de pH com sonda
  • Escala
  • Calculadora

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Instruções

  1. 1

    Use o produto da molaridade da solução final e do volume para determinar o número de moles exigido da base. Por exemplo, se 2 litros de uma solução 0,1 M de tampão Tris são necessários, então, o número de moles de Tris requerido é:

    0,1 moles / litro x 2 litros = 0,2 moles de base Tris

  2. 2

    Calcule a massa requerida do tampão através da multiplicação do número de moles necessários pelo peso molecular da base. Por exemplo, a massa de 0,2 moles de Tris base é igual a:

    0,2 moles Tris x 121,1 g / mol = 24,22 g de Tris

  3. 3

    Meça a massa adequada da base em uma escala.

  4. 4

    Dissolva a base em água destilada utilizando uma barra de agitação magnética e uma placa de aquecimento. Faça isso em um volume de água ligeiramente menor do que o volume da solução final (950-975 mL para cada litro de solução final). A variação de pH do tampão Tris requer ajustes. Também é indicado preparar o tampão na temperatura que vai ser utilizada durante o ensaio. O ensaio com Tris apresenta grandes variações de pH dependendo da temperatura.

  5. 5

    Titule a solução tampão de Tris com ácido clorídrico 1 M, usando um medidor de pH.

  6. 6

    Leve a solução ao volume final com água destilada num balão volumétrico.

Dicas & Advertências

  • Para economizar o tempo da preparação de uma solução tampão, você pode usar um tampão concentrado pronto no pH necessário e diluir para o volume e molaridade desejada.
  • Prepare a solução tampão na mesma temperatura em que vai ser utilizada para evitar alterações consideráveis de pH.
  • Evite ajustes demorados de pH, titule apenas após a diluição até a concentração desejada. Dissolver em volumes muito pequenos ocasionará titulações repetidas.
  • Tenha cuidado ao manusear ácidos e bases.
  • Use óculos de proteção.

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