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Como cultivar cogumelos a partir de esporos

Atualizado em 21 fevereiro, 2017

Cogumelos podem ser cultivados a partir de esporos ou cultura de tecidos. Cultivos de esporos resultam em populações de cogumelos geneticamente diferentes. Ele é útil quando se deseja isolar e testar novas cepas. Os procedimentos para desenvolvimento de cogumelos são espécie-específicos. Supõe-se que o produtor saiba como cultivar um cogumelo de interesse, em particular, uma vez que prole o suficiente tenha sido obtida.

Instruções

Uma coleção de cogumelos Agaricus (Photos by Ian Grant, Jason Hollinger)

    Preparando os materias

  1. Prepare 500 a 1000 ml de MEA, de acordo com as instruções do fabricante.

  2. Coloque a solução de cloreto de sódio nos tubos de ensaio e o MEA nos frascos Erlenmeyer. Não encha os tubos e frascos mais do que até a metade e cubra levemente.

  3. Esterilize a solução de cloreto de sódio, MEA e placas de Petri (caso não sejam estéreis) em uma panela de pressão, à 121 graus Celsius e 1 atm, por 15 a 20 minutos.

  4. Remova o MEA, a solução cloreto de sódio e as placas de Petri da panela de pressão e deixe esfriar.

  5. Quando o MEA tiver esfriado o suficiente para que seja manejado, mas antes de solidificar, levante a tampa de cada placa de Petri cuidadosamente e coloque de 10 a 20 ml de MEA fundido.

  6. Deixe as placas de MEA e cloreto de sódio esfriarem à temperatura ambiente.

    Colocando os esporos nas placas

  1. Esterilize o gancho em uma lamparina de álcool. Deixe que o fio esquente até ficar vermelho e, então, deixe esfriar por 5 segundos.

  2. Mergulhe o gancho na solução de cloreto de sódio para coletar uma gota de fluido. Espalhe a gota sobre uma pequena área na impressão dos esporos (ou outra fonte de esporos) para criar uma mistura líquido/esporos. Repita esse processo diversas vezes, esterilizando o gancho entre cada uma.

  3. Mergulhe o gancho na suspensão de cloreto de sódio e esporos, para coletar esporos.

  4. Erga a tampa da placa de ágar apenas o suficiente para permitir acesso para o gancho.

  5. Espalhe a suspensão de esporos do gancho sobre a superfície do ágar e pegue a placa novamente. Repita com quantas placas você desejar (pelo menos cinco ou seis).

  6. Feche as placas de ágar com filme plástico para prevenir o ressecamento. Incube os esporos a temperatura e condições de iluminação adequadas para as espécies.

  7. Observe as placas a cada poucos dias, procurando por sinais de germinação. Um crescimento branco felpudo (um micélio) na superfície do ágar, indica a presença de um fungo (mas pode não ser um fungo que cresceu à partir dos esporos).

    Cultivando cogumelos a partir de esporos

    Isolando uma cultura pura

  1. Compare o micélio com descrições publicadas do micélio que você está tentando cultivar.

  2. Se o micélio parecer com o esperado, purifique a cultura, cortando pedaços e transferindo-os para placas de ágar fresco.

  3. Continue cortando pedaços da ponta das colônias em expansão, até que uma colônia pura e livre de bactérias seja obtida.

    Preparação da prole

  1. Corte e transfira pedaços de micélio purificado para jarras de fibras esterilizadas ou substrato de lascas de madeira. O tipo de substrato usado depende da espécie do cogumelo.

  2. Incube os micélios principais em condições adequadas para a espécie, até que o substrato esteja completamente colonizado com micélios.

  3. Agite os recipientes dos micélios periodicamente para fragmentar o substrato e agilizar a colonização.

  4. Use os micélios principais para inocular outros recipientes e produzir mais micélios.

    Inoculando o substrato para crescimento de cogumelos

  1. Agite os recipientes dos micélios vigorosamente, para fragmentar os mesmos.

  2. Coloque os micélios em sacos ou bandejas de substrato para o crescimento de cogumelos.

  3. Misture cuidadosamente os micélios no substrato, mexendo ou agitando.

  4. Proceda de acordo com métodos publicados sobre como cultivar o micélio e iniciar o processo de frutificação das espécies sendo cultivadas.

Dicas

  • Trabalhe rapidamente quando estiver despejando o ágar ou transferindo o inóculo, para reduzir a contaminação.
  • Tempo e esforço podem ser poupados, comprando placas de ágar estéreis e pré-preparadas.
  • O MEA é um bom meio geral para o cultivo de cogumelos, mas outro tipo de meio pode ser mais apropriado, dependendo da espécie.

Aviso

  • Panelas de pressão podem ficar quentes e causar ferimentos. Siga as instruções de manutenção e operação do fabricante.
  • Recipientes esterilizados são quentes e precisam ser manejados com luvas resistentes ao calor, para evitar queimaduras e derramamentos.
  • Deixe as tampas dos recipientes sendo esterilizados soltas, para permitir que a pressão equalize durante o processo de aquecimento e resfriamento.
  • Todos os recipientes a serem esterilizados devem ser feitos de material autoclavável.

O que você precisa

  • Esporos de cogumelos
  • Ágar de extrato de malte (MEA)
  • Placas de Petri (pratos)
  • Substrato adequado para as espécies
  • Lamparina de álcool
  • Gancho de inoculação
  • Solução de cloreto de sódio (0.9 por cento W/V)
  • Panela de pressão
  • Tubos de ensaio
  • Frascos Erlenmeyer
  • Filme plástico
  • Jarras ou sacos para a produção de micélios
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