Como preparar uma solução de BSA 1%

Escrito por anna magracheva | Traduzido por joanna riva
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Como preparar uma solução de BSA 1%
Evite transferências desnecessárias entre recipientes para prevenir a contaminação (Comstock/Comstock/Getty Images)

A albumina sérica bovina (BSA) é a proteína mais abundante no soro de bovinos. Ela é amplamente utilizada em análises bioquímicas, sobretudo em análises imunológicas como as imunoadsorvente ligado à enzima (ELISA), Western Blot e imunohistoquímica. O BSA estabiliza as enzimas durante durante a digestão do ácido desoxirribonucleico e previne ligações não-específicas de proteínas aos tubos de ensaio e membranas. Ela também é utilizada como um padrão para determinar a quantidade de proteínas em uma análise; uma quantidade desconhecida da proteína analisada é comparada a uma quantidade conhecida de BSA. Preparar uma solução de BSA de 1 por cento é bastante simples.

Nível de dificuldade:
Moderadamente fácil

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O que você precisa?

  • Béquer esterilizado
  • Barra de agitação magnética esterilizada
  • Placa de agitação
  • BSA em pó
  • Balança
  • Prato para pesagem
  • Proveta
  • Água deionizada
  • Garrafa de armazenamento esterilizada

Lista completaMinimizar

Instruções

  1. 1

    Preencha um béquer esterilizado com 70 ml de água e coloque uma barra de agitação magnética esterilizada no mesmo. Coloque o béquer sobre a placa de agitação e a ligue em uma velocidade baixa.

  2. 2

    Coloque 1 g de BSA em pó no prato de pesagem. Transfira o BSA para o béquer. Se for necessário, aumente a agitação até que o BSA dissolva. Espere que dissolva completamente antes de prosseguir.

  3. 3

    Transfira o conteúdo do béquer para uma proveta. Deixe a barra de agitação no béquer.

  4. 4

    Complete o volume na proveta até 100 ml adicionando água deionizada.

  5. 5

    Transfira o conteúdo da proveta para uma garrafa de armazenagem esterilizada.

Dicas & Advertências

  • Armazene a solução de BSA a 4°C.
  • Para fazer um volume diferente, simplesmente divida o volume final por 100 e dissolva a quantidade de BSA em pó na água deionizada. Por exemplo, para fazer 1000 ml (1 L), divida 1000 por 100 para obter 10, e então dissolva 10 mg de BSA em 1000 ml de água.
  • Utilize equipamentos de proteção individual ao trabalhar com agentes biológicos em laboratório. Estes incluem jalecos, luvas e óculos de proteção para protegê-lo de respingos.

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